Kanał potasowy KIR4.1 jako cel immunologiczny w stwardnieniu rozsianym AD 6

Do badania wykorzystaliśmy oczyszczone IgG z próbek surowicy osób z chorobami neurologicznymi. Zaobserwowaliśmy kolokalizację sygnału immunofluorescencyjnego, gdy zastosowaliśmy monoklonalne przeciwciało anty-KIR4.1 i oczyszczone przeciwciała IgG z próbek surowicy osób ze stwardnieniem rozsianym na szczurzych odcinkach móżdżku. Nie obserwowaliśmy kolokalizacji sygnału, gdy stosowaliśmy oczyszczone IgG z próbek surowicy osób z innymi chorobami neurologicznymi (Figura 2A). Następnie przeprowadziliśmy immunolabelizację sekcji móżdżkowych od 10-dniowych myszy typu dzikiego i myszy z nokautem Kir4.1 za pomocą IgG z próbek surowicy osób ze stwardnieniem rozsianym. Kir4.1 ulega ekspresji w dużych ilościach w mózgu myszy 10 dni po urodzeniu21. Próbki surowicy dodatniej pod względem przeciwciał KIR4.1 od osób z zabarwionymi stwardnieniem rozsianym komórkami glejowymi w odcinkach móżdżku od myszy typu dzikiego, ale nie w odcinkach myszy knockout (Figura 2B). Następnie przygotowaliśmy mieszane pierwotne kultury glejowe myszy. Oczyszczone przeciwciała IgG z próbek surowicy osób ze stwardnieniem rozsianym wybarwiały błony komórek glejowych, co wykryto za pomocą immunofluorescencji i cytometrii przepływowej (ryc. S3 w dodatkowym dodatku), a przeciwciała anty-KIR4.1 wyizolowano z oczyszczonych przeciwciał IgG z surowicy. osobniki osób ze stwardnieniem rozsianym związanych z komórkami transfekowanymi KIR4.1, ale nie transfekowanymi pozornie (ryc. S4 w dodatkowym dodatku). Doszliśmy do wniosku, że przeciwciała anty-KIR4.1 istnieją u niektórych osób ze stwardnieniem rozsianym i że przeciwciała te reagują z białkiem KIR4.1 wyrażanym na komórkach glejowych. Specyficzność przeciwciał anty-KIR4.1 dla stwardnienia rozsianego
Rycina 3. Rycina 3. Reaktywność surowicy o wysokim mianie białka KIR4.1 w podgrupie pacjentów ze stwardnieniem rozsianym. Do wykrycia przeciwciał anty-KIR4.1 surowicy zastosowano oparty na białku test immunoenzymatyczny (ELISA). Oczyszczony zrekombinowany KIR4.1 z komórek HEK293 był kowalencyjnie sprzężony z płytkami ELISA. Wiązanie z przeciwciałem w surowicy do KIR4.1 określono u zdrowych dawców (HD), u pacjentów z innymi chorobami neurologicznymi (OND), oraz u pacjentów ze stwardnieniem rozsianym lub klinicznie izolowanym zespołem (CIS) w serii odkryć (Panel A), pierwsze seria walidacji (panel B) i druga seria walidacji (panel C). W dwóch pierwszych seriach porównano miana przeciwciał KIR4.1 osób zdrowych, pacjentów z OND oraz pacjentów ze stwardnieniem rozsianym lub CIS z zastosowaniem testu Kruskala-Wallisa na jednostronną analizę wariancji, a następnie wielokrotności Dunna test porównawczy, dla którego pokazano wartości P. W trzeciej serii porównano miano przeciwciał KIR4.1 u pacjentów z OND i MS lub CIS z zastosowaniem testu t Manna-Whitneya.
[hasła pokrewne: kwas gamma aminomasłowy, szefowie wrogowie 2 filmweb, reumpapai ]

Powiązane tematy z artykułem: kwas gamma aminomasłowy reumpapai szefowie wrogowie 2 filmweb